氨基酸分析目前常用的方法有兩大類(lèi)：離子交換法和反相色譜法。其中目前標(biāo)準(zhǔn)和中國(guó)國(guó)標(biāo)的方法是“陽(yáng)離子交換、柱后茚三酮衍生，及可見(jiàn)光570nm和440nm檢測(cè)”。 全自動(dòng)氨基酸分析儀的測(cè)定原理是利用樣品各種氨基酸組分的結(jié)構(gòu)不同、酸堿性、極性及分子大小不同，在陽(yáng)離子交換柱上將它們分離，采用不同pH值離子濃度的緩沖液將各氨基酸組分依次洗脫下來(lái)，再與另*路的茚三酮試劑混合，然后共同流至反應(yīng)器中，于一定溫度下（*溫度為100～130℃）進(jìn)行顯色反應(yīng)，形成在570nm有zui大吸收的藍(lán)紫色產(chǎn)物。其中的脯氨酸和羥基脯氨酸與茚三酮反應(yīng)生成黃色產(chǎn)物，其zui大吸收在440nm。這些有色產(chǎn)物對(duì)570nm、440nm光的吸收強(qiáng)度與洗脫出來(lái)的各氨基酸的濃度（或含量）之間的關(guān)系符合比耳定律，可與標(biāo)準(zhǔn)氨基酸比較作定性和定量測(cè)定。 |
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